信帆生物-ATP生物發(fā)光檢測(cè)試劑盒方便、快速、靈敏
簡介：
利用螢火蟲熒光素酶催化底物熒光素的轉(zhuǎn)化，利用ATP的能量發(fā)射出光子。發(fā)光信號(hào)與存在的ATP量呈正比的原理進(jìn)行ATP的生物發(fā)光檢測(cè)。該產(chǎn)品可用于快速、定量測(cè)定液體樣品中或細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。產(chǎn)品中的Lysis Buffer能夠有效裂解細(xì)菌、細(xì)胞以及微生物樣品，充分釋放ATP，適用于多種樣本來源的ATP檢測(cè)。Luciferase/Luciferin substrate采用優(yōu)化的酶反應(yīng)體系，產(chǎn)生的熒光在一分鐘內(nèi)保持穩(wěn)定。該產(chǎn)品檢測(cè)靈敏度達(dá)到 10-16 mol，檢測(cè)范圍在 10-11至 10-16 mol之間，可用于微量ATP檢測(cè)。
適用范圍：
可用于檢測(cè)多種來源樣品中細(xì)菌、細(xì)胞以及微生物的 ATP，及微量 ATP 檢測(cè)。
樣品裂解：
1.貼壁細(xì)胞的裂解：
吸除培養(yǎng)液，加入足夠覆蓋細(xì)胞的 Lysis Buffer（如 24 孔細(xì)胞培養(yǎng)板加入 150ul Lysis Buffer），可以使用移液器進(jìn)行反復(fù)吹打或晃動(dòng)培養(yǎng)板使 Lysis Buffer 充分接觸并裂解細(xì)胞，室溫靜置 5-10min 后，吸取上清進(jìn)行檢測(cè)。
2.懸浮細(xì)菌、細(xì)胞的裂解：
轉(zhuǎn)移懸浮液到 1.5ml 離心管中，離心沉淀細(xì)胞，棄盡上清，按照 24 孔板每孔的細(xì)胞量對(duì)應(yīng) 150μl Lysis Buffer 的比例加入 Lysis Buffer，移液器反復(fù)吹打幾次，室溫靜置 5-10分鐘后，吸取上清進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于懸浮樣品的裂解也可以將樣品充分混勻后直接吸取適量體積加入 Lysis Buffer，移液器反復(fù)吹打幾次，室溫靜置 5-10 分鐘后進(jìn)行檢測(cè)。樣品體積不超過 Lysis Buffer 的1/3。 對(duì)植物、
3.動(dòng)物組織樣品的裂解：
取適量組織樣品，加入適當(dāng)比例的 Lysis Buffer（如 20mg 植物組織加入 500ul Lysis Buffer）后用玻璃勻漿器或研缽進(jìn)行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解，離心后取上清進(jìn)行檢測(cè)。
其它來源的 ATP：
對(duì)于其它有效方法如三lv乙酸法等提取的 ATP 樣品，或游離 ATP 的檢測(cè)，可直接稀釋
到檢測(cè)范圍后用配制好的 Luciferase/Luciferin Reagent 進(jìn)行檢測(cè)。
試劑盒優(yōu)點(diǎn)多多：
1. 方便：反應(yīng)試劑容易配制。
2. 檢測(cè)試劑產(chǎn)生的熒光穩(wěn)定性高，不需要快速混勻操作。
3. 快速：樣品裂解在 5-10 分鐘內(nèi)完成，加入稀釋后的 Luciferase/Luciferin substratet即可檢測(cè)。
4. 靈敏：可檢測(cè)少至 10-16 mol ATP。
注意事項(xiàng)：
1、 操作過程中需注意避免 ATP 污染，尤其是檢測(cè)微量 ATP 時(shí)，配制試劑時(shí)需用無菌水，使用的吸頭需滅菌，操作時(shí)戴一次性手套。
2、 Luciferase 活性可被多種去污劑抑制，其zui'佳 pH 為 7-8 之間，本試劑盒提供的裂解液用量不超過 10ul 時(shí)對(duì) Luciferase/Luciferin Reagent 發(fā)光值沒有影響，但是如果需要采用其它裂解方法提取 ATP 時(shí)，需考慮裂解液成分對(duì) luciferase 活性的影響。
3、 配制好的 Luciferase/Luciferin Reagent 在室溫放置 6 小時(shí)，4℃放置 7 天內(nèi)發(fā)光值下降在 10%之內(nèi)，因此檢測(cè)微量 ATP 時(shí)，為了降低背景發(fā)光值，可將 Luciferase/Luciferin Reagent 室溫放置 6 小時(shí)內(nèi)或 4℃放置 7 天內(nèi)以充分消耗 ATP
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