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SDS-PAGE凝膠配制試劑盒試劑使用量
更新時(shí)間:2021-05-26   點(diǎn)擊次數(shù):693次

SDS-PAGE凝膠配制試劑盒試劑使用量

 

描述:本產(chǎn)品提供了配制SDS-PAGE凝膠所需的各種試劑,用戶只需自備制膠器具和蒸餾水,即可配制高質(zhì)量的各種濃度的變性PAGE膠,方便,快捷。本試劑盒至少可以配制30塊常規(guī)大小的PAGE膠,并且其中的分離膠緩沖液和濃縮膠緩沖液中已加入10%SDS,使用時(shí)無需另外加入。

 

灌制濃縮膠(試劑使用量參考附表3)

(1)去除覆蓋在分離膠上的水層,并用濾紙吸干,水份吸不干,可能會(huì)導(dǎo)致濃縮膠和分離膠分開。

(2)將不同體積的30%Acr-Bis(29:1)、分離膠緩沖液和雙蒸水在小燒杯中混合。

(3)加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌混勻,避免產(chǎn)生氣泡。

(4)將濃縮膠溶液加至分離膠的上面,插入樣品梳,避免產(chǎn)生氣泡,靜置20-30min,直至濃縮膠聚合。

(5)待凝膠聚合后,小心拔下梳子,以免破壞加樣孔。

(6)進(jìn)行常規(guī)電泳。

注意事項(xiàng):

1.10%APS配置好后,應(yīng)當(dāng)-20℃保存,并且應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,以防失效。

2.TEMED易揮發(fā),使用后請(qǐng)擰緊瓶蓋。

3.凝膠凝聚的速度與溫度等關(guān)系密切,可通過調(diào)節(jié)APS和TEMED的用量,控制凝膠的聚合速度,凝膠聚合過快不利于操作。

4.丙烯酰胺,TEMED等有毒,操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴手套。

5.在凝膠配制過程中,應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡。

6.在分離膠上層加蒸餾水時(shí)要小心操作,加水時(shí)速度不宜過快。

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