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重組組織因子的制備工藝
更新時間:2025-02-26   點(diǎn)擊次數(shù):87次

重組組織因子的制備工藝

 

產(chǎn)品介紹:人組織因子是一個由 263 個氨基酸殘基組成的跨膜單鏈糖蛋白。其中氨基端219 個氨基酸殘基位于細(xì)胞膜外,緊隨其后的23個氨基酸殘基則穿過細(xì)胞膜,其余21個氨基酸殘基位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。正常情況下組織因子不存在于循環(huán)中或不與循環(huán)血液接觸,只有當(dāng)血管壁的完整性遭到破壞時TF 才暴露于循環(huán)血液,通過激活凝固級聯(lián)反應(yīng)發(fā)揮止血作用。

 

定義:重組組織因子是利用基因工程技術(shù),將人的組織因子(Tissue Factor, TF)基因片段克隆到適當(dāng)?shù)乃拗骷?xì)胞中,經(jīng)過表達(dá)、純化等工藝過程獲得的重組蛋白。

來源:原始的組織因子是一種跨膜糖蛋白,屬于細(xì)胞因子受體超家族,是凝血因子VIIfVII)的受體,在血管損傷時觸發(fā)凝血級聯(lián)反應(yīng)。

 

產(chǎn)品名稱:人重組組織因子

宿主:大腸桿菌

分子量:27.4kDa

純度:95%SDS-PAGE

緩沖體系:Tris 20mM,NaCl 150mM,PH7.0-7.5

保存條件: -80

有效期:12個月

包裝規(guī)格:根據(jù)客戶需求

 

制備工藝

基因克?。簩⑷说慕M織因子基因片段克隆到表達(dá)載體中,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒。

細(xì)胞培養(yǎng):將重組表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入宿主細(xì)胞(如大腸桿菌、真核細(xì)胞等),進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

發(fā)酵表達(dá):在適當(dāng)?shù)臈l件下進(jìn)行高密度發(fā)酵,使重組組織因子在宿主細(xì)胞中高效表達(dá)。

純化:通過免疫親和層析、離子交換層析、凝膠過濾等純化技術(shù),獲得高純度的重組組織因子。

 

注意事項:

1、該產(chǎn)品僅用于科研實驗使用,不能用于臨床醫(yī)療診斷。

2、反復(fù)凍融會引起產(chǎn)品降解,建議分裝成需要使用量的等份大小,在需要時再進(jìn)行解凍。


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