產(chǎn)品名稱：永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

英文名稱：hCMEC/D3

培養(yǎng)基：內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基：500mlECM+25mlFBS+5mlECGS+5mlP/S

形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，多角形，梭形，邊緣不規(guī)則，單層貼壁生長，背景干凈，不產(chǎn)色素，無空泡

生長條件：37℃；5%CO2+95%空氣

生長特性：貼壁生長

儲(chǔ)存方式：液氮

傳代方法：

復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速?zèng)]入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1min內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL*培養(yǎng)基的離心管內(nèi)，1000-1200rpm離心5min，棄去上清液，用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰霉（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細(xì)胞層某處，肉眼可見細(xì)胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰霉，加入5-6mL*培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，把細(xì)胞層吹落，吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。；④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí)，重復(fù)傳代操作或者凍存。 

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